Tag Archives: антитела
Протеолитическая активность IgG сыворотки крови крыс линии Wistar при экспериментальном ревматоидном артрите
Ю. Я. Кит1, С. Л. Мироновский3, И. И. Криль2,
А. М. Гаврылюк2, В. В. Чопяк2, Р. С. Стойка1
1Институт биологии клетки НАН Украины, Львов;
2Львовский национальный медицинский университет имени Данила Галицкого, Украина;
3Львовский национальный университет имени Ивана Франко, Украина;
e-mail: kit@cellbiol.lviv.ua
Целью работы было исследование протеолитической активности IgG сыворотки крови крыс линии Wistar при экспериментальном ревматоидном артрите (ЭРА), индуцированном коллагеном быка ІІ типа. Для этого 20 крыс иммунизировали препаратом коллагена быка II типа (Sigma-Aldrich, США) в присутствии адъюванта Фрейнда. Развитие ЭРА определяли по воспалению конечностей животных. Препараты IgG выделяли из сыворотки крови иммунизированных и неиммунизированных животных, осаждая антитела 33%-ым раствором сульфата аммония с последующей хроматографией на протеин-G-сефарозной колонке. В качестве субстрата протеолитической активности антител использовали: коллаген быка ІІ типа, гистоны тимуса теленка, основной протеин миелина (ОПМ), БСА, коровий казеин. Установлено, что препараты IgG сыворотки крови крыс с ЭРА способны разрушать гистон Н1 и ОПМ, но каталитически неактивны относительно коллагена ІІ, казеина, БСА и коровых гистонов. IgG сыворотки крови неиммунизированных крыс не обладают протеолитической активностью ни к одному из этих протеиновых субстратов. Полученные данные указывают на то, что при коллагениндуцированном артрите в сыроватке крови крыс появляются IgG-антитела, протеолитически активные в отношении гистона Н1 и ОПМ. Это может быть связано с развитием воспалительных процессов в организме иммунизированных крыс.
Протеолитическая активность IgG-антител мышей, иммунизированных гистонами тимуса теленка
Ю. Я. Кит1, Н. Корний1,3, И. И. Криль2, И. Б. Магоривская1, В. Ткаченко1, Р. А. Билый1,2, Р. C. Стойка1
1Институт биологии клетки НАН Украины, Львов;
e-mail: kit@cellbiol.lviv.ua;
2Львовский национальный медицинский университет имени Даниила Галицкого, Украина;
3Львовский национальный университет имени Ивана Франко, Украина
Целью работы было выяснить способность гистонов вызывать продукцию протеолитически активных IgG-антител у мышей линии BALB/c. Для этого мышей иммунизировали препаратом тотальной фракции гистонов тимуса теленка. IgG из сыворотки крови иммунизированных и неиммунизированных животных очищали осаждением 33%-ым сульфатом аммония с последующей хроматографией протеинов на колонке с протеин G-сефарозой. В качестве субстратов для определения протеолитической активности использовали гистон Н1 и кóровые гистоны, основной протеин миелина (ОПМ), лизоцим, БСА, овальбумин, макроглобулин и казеин, цитохром с. Обнаружено, что IgG сыворотки крови иммунизированных мышей обладают способностью гидролизовать гистон Н1, кóровые гистоны и ОПМ. В то же время IgG сыворотки крови неиммунизированных мышей не проявляли протеолитической активности к этим протеинам. Гель-фильтрация антител показала, что гидролитическая активность к гистонам свойственна именно IgG, а не примесям энзимов. Высокий уровень протеолитической активности препаратов IgG к гистонам был также обнаружен в IgG сыворотки крови больных ревматоидным артритом, но не у IgG клинически здоровых доноров. Полученные данные указывают на то, что внеклеточные гистоны могут вызывать появление протабзимов в организме млекопитающих. В работе также рассмотрены возможное происхождение этих протабзимов и их потенциальная биологическая активность.