Tag Archives: клетки глиомы
Угнетение ERN1 модифицирует гипоксическую регуляцию экспрессии генов TP53, MDM2, USP7 и PERP в клетках глиомы линии U87
С. В. Даниловский1, Д. А. Минченко1,2, О. С. Молявко1,
Л. Л. Карбовский1, Е. В. Ковалевская1, А. Г. Минченко1
1Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, Киев;
e-mail: ominchenko@yahoo.com;
2Национальный медицинский университет им. А. А. Богомольца, Киев, Украина
Стресс эндоплазматического ретикулума и гипоксия являются необходимыми компонентами роста злокачественных опухолей и угнетение ERN1 (от эндоплазматического ретикулума к ядру-1) сигнального пути, который связывает апоптоз с процессами смерти клеток, значительно уменьшает интенсивность процессов пролиферации. Мы исследовали экспрессию генов TP53 (tumor protein 53), MDM2 (TP53 E3 ubiquitin protein ligase homolog), PERP (TP53 apoptosis effector) и USP7 (ubiquitin specific peptidase 7), которые имеют непосредственное отношение к процессам пролиферации и апоптоза, в клетках глиомы с угнетенной функцией ERN1 при гипоксии. Установлено, что блокада функции ERN1 в клетках глиомы линии U87 усиливает экспрессию генов TP53 и USP7, но снижает уровень экспрессии генов MDM2 и PERP. Таким образом, усиленная экспрессия гена TP53 в клетках глиомы с угнетенной функцией ERN1 полностью согласуется со снижением уровня экспрессии убиквитинлигазы MDM2 и повышением уровня USP7, которая деубиквитинирует TP53 и MDM2, индуцируя, таким образом, TP53-зависимую репрессию роста опухолевых клеток и их апоптоз. В то же время, уровень экспрессии генов TP53, MDM2 и USP7 в клетках глиомы с блокадой лишь эндорибонуклеазной активности ERN1 существенно не изменяется, но уровень экспрессии гена PERP при этом сильно увеличивается. Больше того, экспрессия генов TP53 и UPS7 уменьшается при гипоксии лишь в контрольных клетках глиомы, тогда как экспрессия генов MDM2 и PERP усиливается в обоих типах клеток, хотя значительно сильнее в клетках с подавленной активностью ERN1. Результаты работы продемонстрировали, что экспрессия генов TP53, MDM2, UPS7 и PERP зависит от сигнального пути стресса эндоплазматического ретикулума и гипоксии и коррелирует со снижением роста глиомы при блокаде функции ERN1.
Влияние гипоксии на экспрессию генов CCN2, PLAU, PLAUR, SLURP1, PLAT и ITGB1 в клетках глиомы линии U87 с нокдауном гена ERN1
А. Г. Минченко1, А. П. Харькова1, К. И. Кубайчук1,
Д. А. Минченко1,2, Н. А. Глущак1, O. В. Ковалевская1
1Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, Киев;
e-mail: ominchenko@yahoo.com;
2Национальный медицинский университет им. А. А. Богомольца, Киев, Украина
Стресс эндоплазматического ретикулума усиливается в клетках злокачественных опухолей. Он является необходимым фактором роста опухолей. Изучали экспрессию генов, кодирующих важные для пролиферации клеток факторы, в клетках глиомы линии U87 с нокдауном гена ERN1 при гипоксии. Установлено, что блокада ERN1 приводит к увеличению уровня экспрессии мРНК PLAT (tissue plasminogen activator), CCN2 (CCN family member 2) и ITGB1 (integrin β-1), а также к снижению уровня экспрессии мРНК PLAU (urokinase plasminogen activator), PLAUR (plasminogen activator, urokinase receptor) и SLURP1 (secreted LY6/PLAUR domain containing 1). Было показано, что уровень экспрессии мРНК ITGB1 при гипоксии существенно не изменяется в контрольных клетках глиомы, но увеличивается уровень экспрессии мРНК CCN2, PLAUR, SLURP1 и PLAT и снижается уровень экспрессии только мРНК PLAU. В то же время, в клетках глиомы с нокдауном гена ERN1 уровень экспрессии мРНК PLAU, PLAUR и SLURP1 снижается при гипоксии, но увеличивается уровень экспрессии мРНК PLAT и ITGB1 при тех же экспериментальных условиях. Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о том, что уровень экспрессии всех исследованных генов изменяется при блокаде ERN1, а также при гипоксии, и что эффект гипоксии преимущественно зависит от функции сигнального энзима ERN1.