Tag Archives: левамизол

Идентификация энзимов гидролиза тиаминмонофосфата в печени кур

И. К. Колос, А. Ф. Макарчиков

Гродненский государственный аграрный университет;
Институт биохимии биологически активных соединений НАН Беларуси;
e-mail: a_makarchikov@yahoo.com

У животных тиаминмонофосфат (TMP) является интермедиатом на пути деградации коэнзимной формы витамина В1 – тиаминдифосфата. В настоящее время энзимы, участвующие в метаболизме TMP в тканях животных, не идентифицированы. Цель данной работы состоит в исследовании гидролиза TMP в печени кур. В гомогенате печени обнаружены два энзима с активностью TMPазы – растворимый с рН-оптимумом в кислой среде (рН 6,0), и мембраносвязанный, активность которого максимальна при рН 9,0. Мембраносвязанная фосфатаза в присутствии 5 мМ Mg2+ активировалась в 1,7 раза. Кажущаяся Km этого энзима для TMP, рассчитанная в координатах Хейнса, составляет 0,6 мМ. Левамизол ингибировал мембранную TMPазу по бесконкурентному типу с Ki = 53 мкМ. Активность растворимого энзима не зависит от ионов Mg2+ и не ингибируется левамизолом, кажущаяся Km для TMP равна 0,7 мМ. По данным гель-фильтрации на колонке с тойоперлом HW-55 молекулярная масса растворимой TMPазы составляет 17,8 кДа, при этом пик активности TMPазы совпадает с пиками флавинмононуклеотид- и п-нитрофенилфосфатазной активности. Полученные результаты указывают на то, что TMP является физиологическим субстратом низкомолекулярной кислой фосфатазы, известной также как низкомолекулярная протеин-фосфотирозин-фосфатаза. Гидролиз TMP, наблюдаемый в гомогенате печени кур при щелочных рН, обусловлен действием щелочной фосфатазы.