Tag Archives: плазматическая мембрана

Влияние адаптогенных препаратов на функционирование Na(+)/Н(+)-антипортера плазматической мембраны в клетках корней кукурузы в условиях засоленной среды

Н. О. Коваленко, Ж. И. Билык, Т. А. Палладина

Институт ботаники им. Н. Г. Холодного НАН Украины, Киев;
e-mail: tatiana_palladina@ukr.net

Негативное влияние засоленной среды на растения прежде всего обусловлено присутствием Na+ в солях как их главного катиона. На клеточном уровне защита растений от токсического Na+ заключается в поддержании его низкого уровня в цитоплазме путем удаления наружу и в вакуоль с помощью вторичноактивных Na+/H+-антипортеров. Солеустойчивости растений возможно достичь, активируя функционирование этих антипортеров с помощью методов генной инженерии, а также предложенного нами применения биоактивных препаратов.  Исследовано влияние двух дешевых и нетоксичных синтетических препаратов: Метиура (с сильным солепротекторным действием) и Ивина (с незначительным), на функционирование Na+/H+-антипортера плазматической мембраны в клетках корней проростков кукурузы, экспонированых на 0,1 М NaCl. В условиях бессолевого контроля активность Na+/H+-антипортера в клетках корней 8-суточных проростков, оказалась очень низкой, но с возрастом увеличивающейся, тогда как слабая экспрессия гена его протеина не изменялась. Применение препаратов Метиур и Ивин в концентрации 10-7 М путем предобработки семян не влияла на активность антипортера проростков выращенных в нормальных условиях. Односуточная экспозиция на 0,1 М NaCl значительно усиливала активность Na+/H+-антипортера и экспрессию его гена, хотя при 10-суточной экспозиции оба эффекта исчезали. В случае односуточный солевой экспозиции Метиур вызывал дальнейшее усиление активности Na+/H+-антипортера, сохраняющееся при продлении экспозиции до 10 дней, не меняя экспрессию его гена. При этом эффект Ивина на молекулярную активность Na+/H+-антипортера был незначительным, а на экспрессию его гена отсутствовал.  Полученные результаты свидетельствуют о том, что механизм солепротекторного действия Метиура на растения в условиях солевого стресса, вызванного присутствием Na+, обусловлен его способностью усиливать функционирование N+/H+-антипортера плазматической мембраны в клетках корней, что происходит на молекулярном уровне.

Кинетика ингибиторного действия каликс[4]арена С-90 на активность транспортной Ca(2+),Mg(2+)-АТРазы плазматической мембраны гладкомышечных клеток

Т. А. Веклич1, А. А. Шкрабак1, Ю. Ю. Мазур1,
Р. В. Родик2, В. И. Кальченко2, С. А. Костерин1

1Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, Киев;
2Институт органической химии НАН Украины, Киев;
e-mail: kinet@biochem.kiev.ua; vik@ioch.kiev.ua

В экспериментах, выполненных на суспензии плазматических мембран клеток мио­метрия, обработанных 0,1%-ым раствором дигитонина, исследовали кинетические закономерности ингибирующего действия каликс[4]арена С-90 (5,11,17,23-тетра(трифтор)метил(фенилсульфонилимино)метиламино-25,26,27,28-тетрапропоксикаликс[4]арен) на Са2+,Mg2+-АТРазную активность. Проверяли сродство указанного энзима к АТР, ионам Mg и Са в зависимости от концентрации каликсарена С-90, а также его влияние на кооперативный эффект и на максимальную скорость гидролиза АТР. Показано, что на сродство Са2+,Mg2+-АТРазы к АТР каликсарен С-90 практически не влияет, что свидетельствует об отсутствии конкуренции между центрами связывания АТР и С-90. Также отмечено отсутствие влияния на сродство и кооперативный эффект ионов Са при применении каликсарена С-90 в концентрациях до 50 мкМ. Под влиянием каликс[4]арена С-90 наблюдается незначительное увеличение коэффициента активации Са2+,Mg2+-АТРазы хлоридом магния. Во всех трех случаях наблюдалось существенное уменьшение максимальной скорости гидролиза АТР, что в сочетании с отсутствием влияния на константу сродства свидетельствует о неконкурентном механизме ингибирования каликсареном С-90 Са2+,Mg2+-АТРазной активности.