А. В. Блаженко, А. Б. Котлярчук, В. М. Убийвовк

Институт биологии клетки НАН Украины, Львов;
e-mail: Oleksandra.Blazhenko@googlemail.com

Ранее нами был клонирован ген GSH2, что кодирует γ-глутамилцистеинсинтетазу (γGCS) у дрожжей Hansenula рolymorpha. В этой работе проведен анализ молекулярной организации промотора гена GSH2 H. рolymorpha и обнаружены вероятные сайты связывания транскрипционных факторов Yap1, Skn7, Creb/Atf1 и Cbf1. Выяснено, что для полноценной регуляции экспрессии гена GSH2 в ответ на кадмиевый и оксидативный стресс необходима длина промотора GSH2 больше 450 п.н. от начала инициации трансляции. Для исследования транскрипционной регуляции гена GSH2 H. polymorpha сконструирован рекомбинантный штамм, что несет репортерную кассету, у которой регуляторный участок гена GSH2 размером 1,832 т.п.н. слит со структурным и терминаторным участками гена алкогольоксидазы. Показано, что транскрипция гена GSH2 H. polymorpha максимально возрастает на 33% в полной питательной среде при 4-часовой инкубации с 1 мкМ концентрацией ионов кадмия. В минимальной среде экспрессия гена GSH2 не коррелирует с увеличением уровня общего клеточного глутатиона при действии ионов кадмия. Высказано предположение, что увеличение содержания общего клеточного глутатиона при кадмиевом стрессе у дрожжей H. polymorpha, вероятно, не контролируется на уровне транскрипции гена GSH2.