С. Г. Шлыков, Л. Г. Бабич, М. Е. Евтушенко, С. А. Карахим, С. А. Костерин

Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, Киев;
e-mail: sshlykov@biochem.kiev.ua

Влияние антагонистов кальмодулина – кальмидазолиума и трифлуоперазина – на мембранный потенциал митохондрий исследовали с использованием метода проточной цитометрии, конфокальной микроскопии, применяя флуоресцентные зонды TMRM и MTG. Установлено, что антагонист кальмодулина кальмидазолиум в концентрациях от 1 до 10 мкМ дозозависимо снижает мембранный потенциал митохондрий. В то же время, трифлуоперазин в концентрации от 10 до 100 мкМ действует разнонаправленно – в концентрации 10 мкМ увеличивает поляризацию, тогда как в концентрации 100 мкМ вызывает практически полную деполяризацию митохондриальных мембран. Методом конфокальной микроскопии на клетках миометрия показано, что внесение в среду инкубации MTG приводит к появлению флуоресценции в «зеленом» диапазоне. Внесение второго зонда ТМRM приводит к появлению флуоресценции в «красном» диапазоне. Деполяризация митохондрий протонофором СССР и 10 мМ NaN₃ сопровождается снижением интенсивности «красной» флуоресценции, при этом «зеленая» флуоресценция сохраняется. Внесение в среду инкубации 10 мкМ кальмидазолиума или 100 мкМ трифлуоперазина через 10–15 мин инкубации приводит к практически полному гашению флуоресценции зонда ТМRM. Таким образом, при использовании потенциалчувствительных флуоресцентных зондов TMRM и MTG продемонстрировано, что антагонисты кальмодулина модулируют мембранный потенциал митохондрий клеток миометрия.

Ключевые слова: кальмидазолиум, клетки миометрия, конфокальная микроскопия, мембранный потенциал митохондрий, проточная цитометрия, трифлуоперазин, фракция митохондрий